摘要： 肝癌作为全球严重威胁人类健康的恶性肿瘤，早期精准诊断对改善患者预后意义非凡。本研究聚焦新型生物标志物联合检测在肝癌精准诊断方面的应用价值，对多种新型生物标志物展开检测分析，并与传统诊断手段对比，评估其在肝癌诊断准确性、敏感性与特异性上的优势，旨在为肝癌早期诊断与个性化治疗提供更有力依据。

一、引言

肝癌的发病与发展是多因素、多阶段交织的复杂过程，其在全球恶性肿瘤的发病率与死亡率排名中均居前列。当前临床常用的肝癌诊断方法，如血清甲胎蛋白（AFP）检测、超声检查、计算机断层扫描（CT）以及磁共振成像（MRI）等，虽在一定程度上能察觉肝脏病变，但仍有诸多局限。例如部分肝癌患者 AFP 水平无升高表现，影像学检查对于早期微小肝癌易出现漏诊情况。因此，探寻更为灵敏、特异的新型生物标志物以及联合检测策略，对提升肝癌精准诊断水平极为关键。

二、新型生物标志物的遴选与敲定

伴随分子生物学技术的迅猛发展，众多潜在的肝癌新型生物标志物被挖掘。本研究经广泛查阅国内外相关文献，并结合前期预实验筛选，确定了以下几种颇具潜在应用价值的新型生物标志物：高尔基体蛋白 73（GP73）、异常凝血酶原（DCP）、循环肿瘤细胞（CTC）、微小 RNA（miRNA）等。这些生物标志物在肝癌的发生发展进程中，分别涉及细胞增殖、凋亡、血管生成、侵袭转移等不同生物学机制，有望从多元角度映射肝癌的生物学特性，进而提高诊断效能。

三、研究对象与方法

（一）研究对象

本研究共纳入 [X] 例受试者，其中肝癌组 [X] 例，均经病理组织学确诊为肝细胞癌；良性肝病组 [X] 例，涵盖肝硬化、慢性肝炎等患者；健康对照组 [X] 例，为体检无肝脏疾病及其他重大疾病的健康志愿者。所有研究对象均签署知情同意书，并详尽记录其临床资料。

（二）标本采集与处置

采集所有受试者的空腹静脉血，分离血清与血浆后，分别储存于 -80℃冰箱备用。针对循环肿瘤细胞检测，运用特殊的细胞分离富集技术处理血液标本，以提升 CTC 的检出率。

（三）生物标志物检测手段

血清学检测：采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测 GP73、DCP 水平，严格依照试剂盒说明书规范操作，运用酶标仪测定吸光度值，并计算各标志物的浓度。

循环肿瘤细胞检测：借助免疫磁珠分选结合荧光原位杂交（FISH）技术检测 CTC。凭借特定的肿瘤细胞表面标志物抗体标记磁珠，分离富集血液中的 CTC，随后开展 FISH 检测，观测肿瘤细胞的染色体异常状况，以判定 CTC 的存在及数量。

微小 RNA 检测：提取血清中的总 RNA，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT - PCR）技术检测特定 miRNA 的表达水平。选定内参基因进行标准化，计算 miRNA 的相对表达量。

（四）统计学剖析

运用 SPSS [X] 软件执行数据分析。计量资料以均数 ± 标准差（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用 LSD - t 检验；计数资料组间比较采用 χ² 检验。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算曲线下面积（AUC），以评估各生物标志物及联合检测模式的诊断效能，确定最佳诊断截断值，并对比其敏感性和特异性。P < 0.05为差异具备统计学意义。

四、结果

（一）新型生物标志物在不同组间的表达水平

相较于健康对照组与良性肝病组，肝癌组患者血清 GP73、DCP 水平显著上扬（P < 0.01）；肝癌组患者外周血 CTC 阳性率明显高于良性肝病组与健康对照组（P < 0.01）；特定 miRNA 在肝癌组中的表达水平与其他两组相较亦存在显著差异（P < 0.01）。

（二）单一生物标志物的诊断效能

绘制各单一生物标志物的 ROC 曲线，结果显示 GP73、DCP、CTC、miRNA 的 AUC 分别为 [X]、[X]、[X]、[X]。其中，DCP 的敏感性较高，可达 [X]%，但特异性相对较低；而 miRNA 的特异性较高，为 [X]%，敏感性为 [X]%。

（三）新型生物标志物联合检测的诊断效能

将上述几种新型生物标志物予以联合检测，采用 Logistic 回归模型构建联合诊断模型，并绘制联合检测的 ROC 曲线。结果表明，联合检测的 AUC 显著高于单一生物标志物检测（P < 0.01），可达 [X]，其敏感性为 [X]%，特异性为 [X]%。联合检测模式于提升肝癌诊断准确性方面优势显著，可有效降低漏诊与误诊率。

五、讨论

（一）新型生物标志物在肝癌诊断中的作用机理

GP73 是定位于高尔基体的跨膜糖蛋白，在正常肝脏组织中表达量低，而在肝癌细胞中呈高表达态势，可能与肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力存在关联。DCP 是维生素 K 缺乏或拮抗剂 - II 诱导的蛋白质，其异常升高与肝癌细胞的去分化及异常凝血功能紧密相连。CTC 作为从肿瘤原发灶或转移灶脱落进入血液循环的肿瘤细胞，能够直观反映肿瘤的侵袭转移潜能，其数量与特征和肝癌患者的预后息息相关。miRNA 是一类内源性非编码小 RNA，通过调控基因表达参与肝癌的发生发展进程，特定 miRNA 的异常表达可充当肝癌早期诊断的潜在标志物。

（二）联合检测的优势与价值

本研究成果显示，单一生物标志物在肝癌诊断中均存在一定的局限性，而新型生物标志物联合检测能够整合不同标志物的长处，显著提升诊断效能。通过联合检测多种生物标志物，可从多个生物学层面获取肝癌相关信息，弥补单一标志物的缺陷，提高诊断的准确性、敏感性与特异性。这对肝癌的早期察觉、早期诊断以及与其他肝脏疾病的鉴别诊断意义重大，有助于临床医生制定更为精准的个体化治疗方案，改善肝癌患者的生存质量与预后。

（三）研究的不足与展望

本研究虽证实了新型生物标志物联合检测在肝癌精准诊断中的应用价值，但仍存在一些短板。其一，本研究为单中心研究，样本量相对有限，可能存在一定的选择偏倚，尚需多中心、大样本的研究进一步验证结果的可靠性。其二，新型生物标志物的检测方法相对繁琐，成本较高，在一定程度上制约了其在临床实践中的广泛应用。未来，随着技术的持续进步与研究的深入，有望开发出更为简便、快捷、经济的检测方法，同时进一步探究新型生物标志物与肝癌临床病理特征、治疗反应及预后的关系，为肝癌的精准医学研究提供更多的依据与支撑。

六、结论

新型生物标志物 GP73、DCP、CTC 和 miRNA 等在肝癌患者中呈现异常表达，联合检测这些生物标志物能够显著提高肝癌的精准诊断水平，具备较高的诊断价值。这种联合检测模式有望成为肝癌早期诊断的有效辅助手段，为肝癌的临床诊疗开辟新的思路与方法，但仍需进一步完善与验证，以推动其在临床实践中的广泛应用。